Karbapeneemiresistenssigeeni (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Tuotteen nimi
HWTS-OT045 karbapeneemiresistenssigeeni (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) -tunnistussarja (fluoresenssi-PCR)
Epidemiologia
Karbapeneemiantibiootit ovat epätyypillisiä β-laktaamiantibiootteja, joilla on laajin antibakteerinen kirjo ja voimakkain antibakteerinen vaikutus.Koska se on stabiili β-laktamaasille ja alhainen toksisuus, siitä on tullut yksi tärkeimmistä antibakteerisista lääkkeistä vakavien bakteeri-infektioiden hoidossa.Karbapeneemit ovat erittäin stabiileja plasmidivälitteisille laajennetun spektrin β-laktamaaseille (ESBL:ille), kromosomeille ja plasmidivälitteisille kefalosporinaaseille (AmpC-entsyymit).
kanava
PCR-sekoitus 1 | PCR-sekoitus 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/HEX | Sisäinen kontrolli | Sisäinen kontrolli |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Tekniset parametrit
Varastointi | ≤-18℃ |
Säilyvyys | 12 kuukautta |
Näytteen tyyppi | Yskös, puhtaat pesäkkeet, peräsuolen vanupuikko |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0 % |
LoD | 103CFU/ml |
Spesifisyys | a) Sarja tunnistaa standardoidut yrityksen negatiiviset referenssit ja tulokset täyttävät vastaavien viitteiden vaatimukset. b) Ristireaktiivisuustestin tulokset osoittavat, että tällä pakkauksella ei ole ristireaktiota muiden hengitysteiden patogeenien kanssa, kuten Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytophilus, Hacinetobophilus, Hacinetobacter oxytoca in, junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, hengitysteiden adenovirus, Enterococcus tai näytteitä, jotka sisältävät muita lääkeresistenttejä geenejä CTX, mecA, SME, SHV, TEM jne. c) Häiriöiden esto: Musiini, minosykliini, gentamysiini, klindamysiini, imipeneemi, kefoperatsoni, meropeneemi, siprofloksasiinihydrokloridi, levofloksasiini, klavulaanihappo, roksitromysiini valitaan häiriötestiin, ja tulokset osoittavat, että yllä mainituilla häiritsevällä reaktiolla ei ole karbapeneemiresistenssigeenien KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM ja IMP havaitsemiseen. |
Sovellettavat instrumentit | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems QuantStudio®5 reaaliaikaiset PCR-järjestelmät SLAN-96P reaaliaikaiset PCR-järjestelmät (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 reaaliaikainen PCR-järjestelmä LineGene 9600 Plus reaaliaikainen PCR-tunnistusjärjestelmä (FQD-96A,HangzhouBioer-tekniikka) MA-6000 reaaliaikainen kvantitatiivinen lämpöpyöräilijä (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 reaaliaikainen PCR-järjestelmä BioRad CFX Opus 96 reaaliaikainen PCR-järjestelmä |
Työnkulku
Vaihtoehto 1.
Suositeltu uuttoreagenssi: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (jota voidaan käyttää Macro & Micro-Test automaattisen nukleiinihappouuttimen (HWTS-3006C, HWTS-3006B) kanssa), valmistaja Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Lisää 200 µl normaalia suolaliuosta tallus sakka.Seuraavien vaiheiden tulee noudattaa uuttoohjeita, ja suositeltu eluutiotilavuus on100 μl.
Vaihtoehto 2.
Suositeltu uuttoreagenssi: Nucleic Acid Extraction tai Purification Reagent (YDP302), valmistaja Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Uutto tulee aloittaa tiukasti käyttöohjeen vaiheen 2 mukaisesti (lisää 200 µl puskuria GA tallussakkaan). ja ravista, kunnes tallus on täysin ripustunut).Käytä eluointiin RNaasi/DNaasi-vapaata vettä, ja suositeltu eluointitilavuus on 100 µl.
Vaihtoehto 3.
Suositeltu uuttoreagenssi: Makro- ja mikrotestinäytteen vapautusreagenssi.Yskösnäyte on pestävä lisäämällä 1 ml normaalia suolaliuosta edellä mainittuun käsiteltyyn tallussakkaan, sentrifugoidaan nopeudella 13 000 r/min 5 minuuttia ja supernatantti hylätään (säilytä 10-20 µl supernatanttia).Jos kyseessä on puhdas pesäke ja peräsuolen vanupuikko, lisää 50 µl näytteenirrotusreagenssia suoraan edellä mainittuun käsiteltyyn tallussakkaan, ja seuraavat vaiheet tulee uuttaa käyttöohjeen mukaisesti.