Clostridium difficile -toksiinin A/B-geeni (C.diff)
Tuotteen nimi
HWTS-OT031A Nukleiinihappojen havaitsemispakkaus Clostridium difficile -toksiinin A/B-geenille (C.diff) (fluoresenssi-PCR)
Todistus
CE
Epidemiologia
Clostridium difficile (CD), grampositiivinen anaerobinen sporogeeninen Clostridium difficile, on yksi tärkeimmistä sairaalainfektioiden aiheuttajista. Kliinisesti noin 15–25 % mikrobilääkkeisiin liittyvästä ripulista, 50–75 % mikrobilääkkeisiin liittyvästä koliitista ja 95–100 % pseudomembranoottisesta enteriitistä johtuu Clostridium difficile -infektiosta (CDI). Clostridium difficile on ehdonaalinen patogeeni, johon kuuluu toksigeenisia ja ei-toksigeenisia kantoja.
Kanava
FAM | tcdAgeeni |
ROX | tcdBgeeni |
VIC/HEX | Sisäinen valvonta |
Tekniset parametrit
Säilytys | ≤-18 ℃ |
Säilyvyysaika | 12 kuukautta |
Näytteen tyyppi | jakkara |
Tt | ≤38 |
CV | ≤5,0 % |
LoD | 200 CFU/ml |
Spesifisyys | Jos tätä testiä käytetään muiden suolistopatogeenien, kuten Escherichia colin, Staphylococcus aureuksen, Shigellan, Salmonellan, Vibrio parahaemolyticuksen, B-ryhmän streptokokin, Clostridium difficilen ei-patogeenisten kantojen, adenoviruksen, rotaviruksen, noroviruksen, influenssa A -viruksen, influenssa B -viruksen ja ihmisen genomisen DNA:n, havaitsemiseen, tulokset ovat kaikki negatiivisia. |
Sovellettavat instrumentit | Applied Biosystems 7500 reaaliaikaiset PCR-järjestelmät Applied Biosystems 7500 -nopeat reaaliaikaiset PCR-järjestelmät QuantStudio®5 reaaliaikaista PCR-järjestelmää SLAN-96P reaaliaikaiset PCR-järjestelmät (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 reaaliaikainen PCR-järjestelmä LineGene 9600 Plus reaaliaikainen PCR-ilmaisujärjestelmä (FQD-96A,HangzhouBioteknologia) MA-6000 reaaliaikainen kvantitatiivinen lämpösykleri (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 reaaliaikainen PCR-järjestelmä BioRad CFX Opus 96 reaaliaikainen PCR-järjestelmä |
Työnkulku
Vaihtoehto 1.
Lisää sakkaan 180 μl lysotsyymipuskuria (laimenna lysotsyymi 20 mg/ml:aan lysotsyymin laimennusaineella), sekoita hyvin pipetillä ja käsittele 37 °C:ssa yli 30 minuuttia. Ota 1,5 ml RNaasi/DNaasi-vapaata sentrifugiputkea ja lisää180 μL positiivista ja negatiivista kontrollia peräkkäin. Lisää10Lisää testattavaan näytteeseen μL sisäistä kontrollia, positiivinen kontrolli ja negatiivinen kontrolli järjestyksessä ja käytä Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.:n nukleiinihappojen uutto- tai puhdistusreagenssia (YDP302) seuraavaan näytteen DNA:n uuttoon. Noudata tarkasti käyttöohjeita tietyissä vaiheissa. Käytä DNaasi-/RNaasi-vapaita H-reagensseja.2O eluointia varten, ja suositeltu eluointitilavuus on 100 μL.
Vaihtoehto 2.
Ota 1,5 ml RNaasi/DNaasi-vapaata sentrifugiputkea ja lisää peräkkäin 200 μl positiivista ja negatiivista kontrollia. Lisää10Lisää testattavaan näytteeseen μL sisäistä kontrollia, positiivinen kontrolli ja negatiivinen kontrolli järjestyksessä ja käytä Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA -pakkausta (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) ja Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor -laitetta (HWTS-3006). Uutto tulee suorittaa käyttöohjeiden mukaisesti tarkasti, ja suositeltu eluointitilavuus on 80 μL.